Test Hantavirus IgG/IgM — hitri kasetni test

Prvi hitri test Hantavirus v portfelju parahealth. Ta CE-IVD certificiran imunokromatografski hitri test (lateral flow) omogoča kvalitativno določanje protiteles IgG in IgM proti Hantavirusu na mestu oskrbe iz človeške polne krvi (kapilarne ali venske), seruma in plazme. Omogoča zgodnje razlikovanje med akutno (IgM-pozitivno) ter preteklo ali rekonvalescentno (IgG-pozitivno) okužbo s Hantavirusom — ključen korak pri diferencialni diagnostiki hemoragične mrzlice z renalnim sindromom (HFRS) in hantavirusnega pljučnega sindroma (HPS).

Serologija Hantavirusa je bila dolgo domena osrednjih laboratorijev — z odzivnimi časi od enega do več dni. Ta hitri test prinaša imunološki signal k bolnikovi postelji, v ambulanto, na urgentni oddelek in na terenske preiskave v desetih minutah, hkrati pa ohranja razlikovanje razredov IgM/IgG, ki je klinično odločilno v zgodnji fazi obravnave suma na hantavirusno bolezen.

Zakaj ta Test Hantavirus

• Prvi hitri test Hantavirus v katalogu parahealth — zapira dolgoletno vrzel v serologiji na mestu oskrbe.
• Hkratno, razredno ločeno odkrivanje protiteles IgG in IgM na eni kaseti z vgrajeno kontrolno črto.
• Rezultat v 10 minutah — brez potrebe po laboratorijski infrastrukturi ali termociklerju.
• Združljivo s kapilarno polno krvjo (vbod v prst), vensko polno krvjo, serumom in plazmo.
• Validirano z običajnimi antikoagulanti heparin, EDTA in natrijev citrat.
• Proizvedeno po standardih CE-IVD in ISO 13485:2016.
• Rok uporabnosti 24 mesecev — trenutna serija velja do 05/2028.
• Posamično zapakirana kaseta in popoln komplet pribora, vključno s sterilnimi lancetami za odvzem iz prsta.

Princip testa — imunokromatografski zajem antigena

Kaseta uporablja rekombinantni Hantavirus-specifični antigen kot obarvan ultralateksni sledilnik. Dve vzporedni testni črti sta prevlečeni z monoklonskimi protitelesi proti človeškim IgM oziroma proti človeškim IgG. Ko protitelesa pacienta ustreznega razreda vežejo sledilni antigen, kompleks protitelo-antigen po membrani potuje s kapilarnim učinkom in se ujame na ustrezni testni črti (G ali M), kar ustvari viden rdeč pas. Notranja kontrolna črta (C) potrjuje pravilen pretok vzorca in celovitost reagentov ne glede na analitični rezultat.

Klinična interpretacija — IgM proti IgG

• IgM-pozitivno / IgG-negativno: zgodnja akutna ali nedavna okužba s Hantavirusom — protitelesa IgM se običajno pojavijo v prvih nekaj dneh po pojavu simptomov.
• IgM-pozitivno / IgG-pozitivno: faza serokonverzije ali aktivna okužba — pacient razvija zgodnji in zreli imunski odziv.
• IgM-negativno / IgG-pozitivno: pretekla izpostavljenost ali rekonvalescenca — IgG vztraja mesece do leta.
• IgM-negativno / IgG-negativno: brez zaznavnih protiteles. Ne izključuje zelo zgodnje okužbe v fazi okna; razmislite o PCR ali ponovnem testiranju.

Postopek korak za korakom

1. Izenačite zaprto testno kaseto in vzorec na sobno temperaturo.
2. Odprite folijsko vrečko in postavite kaseto na čisto, ravno površino — uporabite v eni uri po odprtju.
3. Za polno kri / serum / plazmo: aspirirajte vzorec z enkratno kapalko in dodajte 1 kapljico v okence za vzorec (S).
4. Za vbod v prst: razkužite blazinico prsta s priloženo alkoholno blazinico, prebodite s sterilno lanceto, z kapalko zberite kapljico in dodajte 1 kapljico v okence (S).
5. Dodajte 2 kapljici pufra za redčenje vzorca v okence za redčilo (D) in zaženite časovnik.
6. Odčitajte rezultat po 10 minutah. Rezultati, odčitani po 20 minutah, niso več klinično veljavni.

Analitična občutljivost, specifičnost in zmogljivost

Analitična občutljivost kompleta izpolnjuje interno specifikacijo proizvajalca za najnižjo mejo zaznave — opredeljeno kot najnižja koncentracija protiteles, ki dosledno daje pozitiven signal v vseh validacijskih serijah. Testni črti (G in M) delujeta neodvisno, zato odkrivanje IgM in IgG ni podvrženo medsebojni signalni konkurenci.

Diagnostično specifičnost smo opredelili z (a) kuriranim panelom navzkrižne reaktivnosti proti desetim nepovezanim patogenom in (b) interferenčnim panelom, ki zajema najpomembnejše spremenljivke matrice polne krvi. Oba panela sta povzeta spodaj. Kot pri vsakem serološkem imunokromatografskem testu mora končni klinični sklep združiti rezultat hitrega testa z anamnezo pacienta, simptomatologijo, epidemiološko izpostavljenostjo in — kadar je indicirano — potrditvijo z RT-PCR ali laboratorijskim ELISA.

Panel navzkrižne reaktivnosti

V validacijskih študijah proizvajalca je test pokazal brez navzkrižne reaktivnosti z vzorci, ki so vsebovali:

• Protitelesa virusa ošpic
• Protitelesa virusa rdečk
• Protitelesa virusa influence A
• Serologijo trebušnega tifusa (Salmonella)
• Serologijo leptospiroze
• Vzorce septikemije
• Vzorce epidemičnega cerebrospinalnega meningitisa
• Označevalce virusa hepatitisa B
• Označevalce virusa hepatitisa C

Opomba: zelo visoke koncentracije revmatoidnega faktorja (RF) ali heterofilnih protiteles lahko povzročijo lažno pozitivne reakcije pri katerem koli imunokromatografskem testu IgM. Pri sumljivih RF-pozitivnih pacientih potrdite z ortogonalno metodo.

Odpornost na motnje

Na delovanje ne vplivajo naslednje matrične snovi pri navedenih koncentracijah:

• Bilirubin do 20 mg/dL
• Prosti hemoglobin do 5 mg/mL
• Trigliceridi do 15 mg/mL
• Heparin do 200 IE/mL
• EDTA do 5 mg/mL
• Natrijev citrat do 10 mg/mL

Klinični primeri uporabe

• Sum na okužbo s Hantavirusom pri bolnikih z akutno odpovedjo ledvic, oligurijo, trombocitopenijo ali nekardiogenim pljučnim edemom.
• Razlikovanje HFRS / HPS od leptospiroze, denge, hude influence in drugih virusnih hemoragičnih sindromov.
• Serološko presejanje v medicini dela — gozdarstvo, kmetijstvo, okoljske službe, deratizacija in osebje laboratorijskih živali.
• Preiskovanje izbruhov in sledenje gospodinjskih stikov v endemičnih regijah, vključno z žarišči Puumala v Srednji in Severni Evropi ter žarišči virusov Sin Nombre / Andes v Amerikah.
• Ocena pred potovanjem in po izpostavljenosti za terenske delavce, ki se vračajo z endemičnih območij.

Vrste vzorcev, antikoagulanti in stabilnost

• Polna kri (iz prsta ali venska, z antikoagulantom): stabilna do 3 dni pri 2–8 °C. Testirajte čim prej po odvzemu.
• Serum: odvzet iz venske krvi po koagulaciji; stabilen 2 tedna pri 2–8 °C, dlje pri −20 °C.
• Plazma: svetlorumeni supernatant iz antikoagulirane polne krvi po počitku ali centrifugiranju; stabilnost kot za serum.
• Validirani antikoagulanti: heparin, EDTA, natrijev citrat.
• Zamrznjene vzorce pred testiranjem vrnite na sobno temperaturo.

Kakovost vzorca — vizualni pregled

Pred nanosom vzorca na kratko ocenite njegov videz. Naslednje lastnosti vzorca lahko motijo razlago črt:

• Močno ikterični vzorci (vidno rumeni) — bilirubin nad validiranim območjem.
• Močno hemolitični vzorci — prosti hemoglobin > 9 g/L.
• Hilozni (mlečni / lipemični) vzorci.

Specifikacije

• Oblika: imunokromatografska kaseta z ločenima testnima črtama IgG in IgM ter kontrolno črto.
• Metoda: imunokromatografski zajem antigena (ultralateksni sledilnik).
• Vrste vzorcev: kapilarna ali venska polna kri, serum, plazma.
• Čas do rezultata: 10 minut (okno odčitavanja ≤ 20 min).
• Shranjevanje: 2–30 °C, suho, zaščiteno pred neposredno sončno svetlobo.
• Rok uporabnosti: 24 mesecev od proizvodnje — trenutna serija velja do 05/2028.
• Predvidena uporaba: samo za profesionalno uporabo — in vitro diagnostični medicinski pripomoček.
• Referenčna številka proizvajalca: RNPT96027-01.

Vsebina kompleta (1 test / komplet)

• 1× testna kaseta v folijski vrečki s sušilnim sredstvom
• 1× sterilna lanceta
• 1× enkratna kapalka
• 1× pufer za redčenje vzorca
• 1× alkoholna blazinica
• 1× navodila za uporabo

Shranjevanje kompleta — najboljša praksa

• Hranite zaprto pri 2–30 °C v suhem prostoru, zaščitenem pred neposredno sončno svetlobo.
• Testne kasete ne zamrzujte.
• Pred odprtjem izenačite kaseto in reagente na sobno temperaturo, da preprečite kondenzacijo.
• Odprto kaseto uporabite v 1 uri; ne zapirajte ponovno.
• Ne mešajte sestavin iz različnih serij.

Opombe in omejitve

• Samo kvalitativni rezultat — ne podaja se titer protiteles.
• Negativni rezultat ne izključuje zelo zgodnje okužbe, ko so ravni protiteles še pod analitično mejo zaznave.
• Zelo visoki titri revmatoidnega faktorja ali heterofilnih protiteles lahko povzročijo lažno pozitivne črte.
• Končna diagnoza ostaja odgovornost lečečega zdravnika in mora vključevati klinične ugotovitve, anamnezo izpostavljenosti in dopolnilna laboratorijska testiranja.
• Za enkratno uporabo — ne uporabljajte ponovno ali po natisnjenem datumu izteka.
• Po uporabi kaseto, kapalko, lanceto in posodo s pufrom odstranite kot biomedicinski odpadek v skladu z lokalnimi predpisi.

Kdaj izbrati hitro serologijo proti RT-PCR

RT-PCR za Hantavirus zaznava virusno RNA in je najbolj občutljiv med zelo zgodnjo viremično fazo — običajno v prvih dneh po pojavu simptomov. Ko viremija upade, pade tudi občutljivost PCR, medtem ko se odziv protiteles (najprej IgM, nato IgG) zviša. Kombiniran pristop je idealen: PCR za najzgodnejše okno, ta hitri test IgM/IgG za simptomatske paciente po prvih 3–5 dneh in za retrospektivno seroprevalenco v poklicnih ali epidemičnih razmerah.

Regulatorni status

• CE-IVD — pooblasčeni zastopnik v EU: CMC Medical Devices & Drugs S.L., Málaga, Spain (SRN ES-AR-000000293).
• ISO 13485:2016 — sistem vodenja kakovosti, certificiran pri SGS UK Ltd (CN21/42019).
• Kataloške reference: RNPT96027-01 (1 test / komplet), RNPT96027-20 (20 testov / komplet).

Ozadje — Hantavirusi, epidemiologija in prenos

Hantavirusi so ovojni, enovijni RNA virusi z negativno polariteto iz družine Bunyaviridae. Glodavci — voluharji, poljske miši in podgane — so naravni rezervoarji; ljudje so naključni gostitelji in se okužijo predvsem z vdihavanjem aerosoliziranega urina, iztrebkov ali sline glodavcev, redkeje z neposrednimi ugrizi ali kontaminiranimi živili. Stalen prenos s človeka na človeka je v bistvu omejen na južnoameriški virus Andes.

Klinično se rod deli v dva glavna sindroma. Hemoragična mrzlica z renalnim sindromom (HFRS) prevladuje v Evropi in Aziji; v Nemčiji je milejša, s Puumalo povzročena "nephropathia epidemica" endemična v Bavarskem gozdu, na Schwäbische Alb in v Münsterlandu, z več sto do več tisoč prijavljenimi primeri letno. Hantavirusni pljučni sindrom (HPS) je večinoma omejen na Amerike (Sin Nombre, Andes), s smrtnostjo primerov do 38 %. Oba sindroma imata akuten začetek z vročino, mialgijo in trombocitopenijo, ki mu sledijo organsko specifični zapleti.

Hitro serološko testiranje za IgM in IgG igra ključno vlogo v diferencialni diagnostiki poleg RT-PCR — zlasti kadar so rezultati potrebni pred odzivnimi časi osrednjega laboratorija in kadar se klinična slika prekriva z drugimi zoonotskimi ali arbovirusnimi boleznimi.

Dodatne strokovne informacije

Za poglobljen tehnični in regulatorni pregled hitrega testa Hantavirus obiščite buyhantatest.com.

Proizvedel Shenzhen Reagent Technology Co., Ltd., Shenzhen, China. Referenčna številka proizvajalca RNPT96027-01. Revizija IFU A1, izdano 2025-05-07.