Test Hantavírus IgG/IgM — rýchly kazetový test

Prvý rýchly test Hantavírus v portfóliu parahealth. Tento CE-IVD certifikovaný imunochromatografický rýchly test (lateral flow) umožňuje kvalitatívnu detekciu protilátok IgG a IgM proti Hantavírusu v mieste starostlivosti, z ľudskej plnej krvi (kapilárnej alebo venóznej), séra a plazmy. Podporuje skoré odlíšenie akútnej (IgM-pozitívnej) a prekonanej alebo rekonvalescentnej (IgG-pozitívnej) infekcie Hantavírusom — kľúčový krok v diferenciálnej diagnostike hemoragickej horúčky s renálnym syndrómom (HFRS) a hantavírusového pľúcneho syndrómu (HPS).

Sérológia Hantavírusu bola dlhý čas doménou centrálnych laboratórií — s časom odozvy od jedného do niekoľkých dní. Tento rýchly test prináša imunologický signál priamo k lôžku pacienta, do ambulancie, na pohotovostné oddelenie a do terénnych vyšetrení do desiatich minút, pričom zachováva rozlíšenie tried IgM/IgG, ktoré je klinicky rozhodujúce v ranom štádiu vyšetrovania podozrenia na hantavírusové ochorenie.

Prečo tento Test Hantavírus

• Prvý rýchly test Hantavírus v katalógu parahealth — zatvára dlhoročnú medzeru v sérológii v mieste starostlivosti.
• Súčasná, triedne oddelená detekcia protilátok IgG a IgM na jednej kazete s integrovanou kontrolnou líniou.
• Výsledok za 10 minút — bez potreby laboratórnej infraštruktúry či termocyklera.
• Kompatibilný s kapilárnou plnou krvou (z prsta), venóznou plnou krvou, sérom a plazmou.
• Validovaný s bežnými antikoagulantmi heparín, EDTA a citrát sodný.
• Vyrobené podľa CE-IVD a ISO 13485:2016.
• Doba použiteľnosti 24 mesiacov — aktuálna šarža použiteľná do 05/2028.
• Individuálne zapečatená kazeta plus kompletná sada príslušenstva vrátane sterilných lancet na odber z prsta.

Princíp testu — imunochromatografický záchyt antigénu

Kazeta využíva rekombinantný antigén špecifický pre Hantavírus ako farebný ultralatexový stopovač. Dve paralelné testovacie línie sú potiahnuté monoklonálnymi protilátkami anti-ľudské IgM, respektíve anti-ľudské IgG. Keď sa protilátky pacienta zodpovedajúcej triedy naviazu na stopovací antigén, komplex protilátka-antigén migruje kapilárnym pohybom po membráne a je zachytený na príslušnej testovacej línii (G alebo M), čím vzniká viditeľný červený prúžok. Vnútorná kontrolná línia (C) potvrdzuje správny prietok vzorky a integritu reagencií bez ohľadu na analytický výsledok.

Klinická interpretácia — IgM vs IgG

• IgM-pozitívna / IgG-negatívna: skorá akútna alebo nedávna infekcia Hantavírusom — protilátky IgM sa zvyčajne objavia v priebehu prvých dní po nástupe príznakov.
• IgM-pozitívna / IgG-pozitívna: fáza serokonverzie alebo aktívna infekcia — pacient vytvára súčasne skorú aj zrelú imunitnú odpoveď.
• IgM-negatívna / IgG-pozitívna: prekonaná expozícia alebo rekonvalescencia — IgG pretrváva mesiace až roky.
• IgM-negatívna / IgG-negatívna: žiadne zistiľné protilátky. Nevylučuje veľmi skorú infekciu v okennej fáze; zvážte PCR alebo opakované testovanie.

Postup krok za krokom

1. Vyrovnajte zapečatenú testovaciu kazetu a vzorku na izbovú teplotu.
2. Otvorte fóliové vrecúško a položte kazetu na čistý, rovný povrch — použite do jednej hodiny od otvorenia.
3. Pre plnú krv / sérum / plazmu: nasajte vzorku jednorazovou kvapkadlovou pipetou a pridajte 1 kvapku do okienka pre vzorku (S).
4. Pre odber z prsta: vydezinfikujte končatinu prsta priloženým alkoholovým tampónom, urobte vpich sterilnou lancetou, naberte kvapku pipetou a pridajte 1 kvapku do okienka (S).
5. Pridajte 2 kvapky pufra na riedenie vzorky do okienka riedidla (D) a spustite časomieru.
6. Odčítajte výsledok po 10 minútach. Výsledky odčítané po 20 minútach už nie sú klinicky platné.

Analytická citlivosť, špecifickosť a výkon

Analytická citlivosť súpravy spĺňa internú špecifikáciu výrobcu pre minimálnu detekčnú hranicu — definovanú ako najnižšia koncentrácia protilátok, ktorá konzistentne poskytuje pozitívny signál naprieč validačnými šaržami. Dve testovacie línie (G a M) fungujú nezávisle, takže detekcia IgM a IgG nepodlieha vzájomnej signálovej konkurencii.

Diagnostická špecifickosť bola charakterizovaná prostredníctvom (a) kurovaného panelu krížovej reaktivity proti desiatim nesúvisiacim patogénom a (b) interferenčného panelu zahŕňajúceho najrelevantnejšie premenné matrice plnej krvi. Oba panely sú zhrnuté nižšie. Ako pri každom sérologickom imunochromatografickom teste musí konečný klinický záver kombinovať výsledok rýchleho testu s anamnézou pacienta, symptomatológiou, epidemiologickou expozíciou a — keď je indikované — potvrdením RT-PCR alebo laboratórnym ELISA.

Panel krížovej reaktivity

Vo validačných štúdiách výrobcu test preukázal žiadnu krížovú reaktivitu so vzorkami obsahujúcimi:

• Protilátky vírusu osýpok
• Protilátky vírusu rubeoly
• Protilátky vírusu chrípky A
• Sérológiu brušného týfusu (Salmonella)
• Sérológiu leptospirózy
• Vzorky septikémie
• Vzorky epidemickej cerebrospinálnej meningitídy
• Markery vírusu hepatitídy B
• Markery vírusu hepatitídy C

Poznámka: veľmi vysoké koncentrácie reumatoidného faktora (RF) alebo heterofilných protilátok môžu spôsobiť falšovo pozitívne reakcie v ktoromkoľvek imunochromatografickom IgM teste. U podozrivých RF-pozitívnych pacientov potvrďte ortogonálnou metódou.

Odolnosť voči interferenciám

Výkon nie je ovplyvnený nasledujúcimi matricovými látkami pri uvedených koncentráciách:

• Bilirubín do 20 mg/dL
• Voľný hemoglobín do 5 mg/mL
• Triglyceridy do 15 mg/mL
• Heparín do 200 IU/mL
• EDTA do 5 mg/mL
• Citrát sodný do 10 mg/mL

Klinické prípady použitia

• Podozrenie na infekciu Hantavírusom u pacientov s akútnym zlyhaním obličiek, oligúriou, trombocytopéniou alebo nekardiogénnym pľúcnym edémom.
• Odlíšenie HFRS / HPS od leptospirózy, dengue, ťažkej chrípky a iných vírusových hemoragických syndrómov.
• Sérologický skríning v pracovnom lekárstve — lesníctvo, poľnohospodárstvo, environmentálne služby, deratizácia a personál laboratórnych zvierat.
• Vyšetrovanie ohnísk a sledovanie domácich kontaktov v endemických oblastiach, vrátane ohnísk Puumala v strednej a severnej Európe a ohnísk vírusov Sin Nombre / Andes v Amerike.
• Posúdenie pred cestou a po expozícii u terénnych pracovníkov vracajúcich sa z endemických oblastí.

Typy vzoriek, antikoagulanty a stabilita

• Plná krv (z prsta alebo venózna, s antikoagulantom): stabilná až 3 dni pri 2–8 °C. Testujte čo najskôr po odbere.
• Sérum: získané z venóznej krvi po koagulácii; stabilné 2 týždne pri 2–8 °C, dlhodobejšie pri −20 °C.
• Plazma: svetložltý supernatant z antikoagulovanej plnej krvi po odstátí alebo centrifugácii; stabilita ako pri sére.
• Validované antikoagulanty: heparín, EDTA, citrát sodný.
• Pred testovaním nechajte zmrazené vzorky vyrovnať na izbovú teplotu.

Kvalita vzorky — vizuálna kontrola

Pred nanesením vzorky krátko posúďte jej vzhľad. Nasledujúce vlastnosti vzorky môžu narušiť interpretáciu línií:

• Silne ikterické vzorky (viditeľne žlté) — bilirubín nad validovaným rozsahom.
• Silne hemolytické vzorky — voľný hemoglobín > 9 g/L.
• Chylózne (mliečne / lipemické) vzorky.

Špecifikácie

• Formát: imunochromatografická kazeta so samostatnými testovacími líniami IgG a IgM plus kontrolnou líniou.
• Metóda: imunochromatografický záchyt antigénu (ultralatexový stopovač).
• Typy vzoriek: kapilárna alebo venózna plná krv, sérum, plazma.
• Čas do výsledku: 10 minút (čítacie okno ≤ 20 min).
• Skladovanie: 2–30 °C, suché miesto, mimo priameho slnečného žiarenia.
• Doba použiteľnosti: 24 mesiacov od výroby — aktuálna šarža použiteľná do 05/2028.
• Určené použitie: len na profesionálne použitie — in vitro diagnostická pomôcka.
• Referenčné číslo výrobcu: RNPT96027-01.

Obsah súpravy (1 test / súprava)

• 1× testovacia kazeta vo fóliovom vrecúšku s vysúšadlom
• 1× sterilná lanceta
• 1× jednorazová kvapkadlová pipeta
• 1× pufor na riedenie vzorky
• 1× alkoholový tampón
• 1× návod na použitie

Skladovanie súpravy — osvedčené postupy

• Skladujte zapečatené pri 2–30 °C na suchom mieste chránenom pred priamym slnečným žiarením.
• Testovaciu kazetu nezmrazujte.
• Pred otvorením vyrovnajte kazetu a reagencie na izbovú teplotu, aby ste zabránili kondenzácii.
• Otvorené kazety použite do 1 hodiny; opätovne nezatvárajte.
• Nemiešajte komponenty z rôznych šarží.

Poznámky a obmedzenia

• Len kvalitatívny výsledok — neuvádza sa titer protilátok.
• Negatívny výsledok nevylučuje veľmi skorú infekciu, keď sú hladiny protilátok ešte pod analytickou detekčnou hranicou.
• Veľmi vysoké titre reumatoidného faktora alebo heterofilných protilátok môžu vytvoriť falšovo pozitívne línie.
• Konečná diagnóza zostáva v zodpovednosti ošetrujúceho lekára a musí integrovať klinické nálezy, expozičnú anamnézu a doplnkové laboratórne vyšetrenia.
• Jednorazové použitie — nepoužívajte opakovane ani po vytlačenom dátume expirácie.
• Po použití zlikvidujte kazetu, pipetu, lancetu a nádobu s pufrom ako biomedicínsky odpad v súlade s miestnymi predpismi.

Kedy zvoliť rýchlu sérológiu vs. RT-PCR

RT-PCR Hantavírusu deteguje vírusovú RNA a je najcitlivejší počas veľmi skorej virémie — zvyčajne prvých dní po nástupe príznakov. S ustúpením virémie klesá citlivosť PCR, zatiaľ čo protilátková odpoveď (najprv IgM, potom IgG) stúpa. Ideálny je kombinovaný prístup: PCR pre najskoršie okno, tento rýchly test IgM/IgG u symptomatických pacientov po prvých 3–5 dňoch a tiež na retrospektívne stanovenie séroprevalencie v pracovnom alebo epidemickom kontexte.

Regulačný status

• CE-IVD — splnomocnený zástupca v EÚ: CMC Medical Devices & Drugs S.L., Málaga, Spain (SRN ES-AR-000000293).
• ISO 13485:2016 — systém manažérstva kvality certifikovaný spoločnosťou SGS UK Ltd (CN21/42019).
• Katalógové referencie: RNPT96027-01 (1 test / súprava), RNPT96027-20 (20 testov / súprava).

Pozadie — Hantavírusy, epidemiológia a prenos

Hantavírusy sú obalené, jednovláknové RNA vírusy s negatívnou polaritou z čeľade Bunyaviridae. Hlodavce — hraboše, poľné myši a potkany — sú prirodzenými rezervoármi; ľudia sú náhodnými hostiteľmi a infekciu získavajú predovšetkým vdýchnutím aerosolizovaného moču, výkalov alebo slín hlodavcov, zriedkavejšie priamym pohrysením alebo kontaminovanými potravinami. Trvalý prenos z človeka na človeka je v podstate obmedzený na juhoamerický vírus Andes.

Klinicky sa rod delí na dva hlavné syndrómy. Hemoragická horúčka s renálnym syndrómom (HFRS) dominuje v Európe a Ázii; v Nemecku je miernejšia, Puumalou vyvolaná "nephropathia epidemica" endemická v Bavorskom lese, Švábskej Alpe a Münsterlande, s niekoľkými stovkami až tisícmi hlásených prípadov ročne. Hantavírusový pľúcny syndróm (HPS) je prevažne obmedzený na Ameriku (Sin Nombre, Andes), s hlásenou smrtnosťou prípadov až 38 %. Oba syndrómy majú akútny začiatok s horúčkou, myalgiou a trombocytopéniou, po ktorom nasledujú orgánovo špecifické komplikácie.

Rýchle sérologické testovanie IgM a IgG zohráva kľúčovú úlohu v diferenciálnej diagnostike popri RT-PCR — najmä keď sú výsledky potrebné pred časom odozvy centrálneho laboratória a keď sa klinický obraz prekrýva s inými zoonotickými alebo arbovírusovými ochoreniami.

Ďalšie odborné informácie

Podrobný technický a regulačný prehľad rýchleho testu Hantavírus nájdete na buyhantatest.com.

Vyrobené spoločnosťou Shenzhen Reagent Technology Co., Ltd., Shenzhen, China. Referenčné číslo výrobcu RNPT96027-01. Revízia IFU A1, vydanie 2025-05-07.